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            如何才能用好安捷倫色譜柱這件事確實值得好好學習

            瀏覽次數:129發布日期:2022-07-21
              安捷倫色譜柱的正確使用和維護非常重要,稍有不慎就會降低色譜柱效率,縮短使用壽命,甚至損壞色譜柱。在色譜操作過程中,為了維護色譜柱,需要注意以下幾個問題。
              
              1、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動。溫度的突然變化或色譜柱從高處墜落都會影響柱內的填充情況;柱壓的突然升高或降低也會對柱內的填料產生沖擊,因此應緩慢調節流速,進樣時閥門轉動不宜過慢。
              
              2、溶劑的組成應逐漸改變,尤其是反相色譜。不應直接由有機溶劑改為全水,反之亦然。
              
              3、一般來說,色譜柱不能反沖。只有在生產廠家表明可以反沖的情況下,才能通過反沖去除殘留在柱頭的雜質。否則,反沖會迅速降低柱效。
              
              4、選擇使用合適的流動相(尤其是pH),避免破壞固定相。有時可以在進樣器前面連接一個預柱。分析柱為鍵合硅膠時,前置柱為硅膠,可以使流動相在進入分析柱前被硅膠“飽和”,避免硅膠基質在分析柱中溶解。
             
              

            安捷倫色譜柱
             

             

              5、避免將基質復雜的樣品,尤其是生物樣品直接注入色譜柱。需要對樣品進行預處理或在進樣器和色譜柱之間連接保護柱。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
              
              6、經常用強溶劑清洗色譜柱,以除去柱內殘留的雜質。清洗時,對流路徑系統中流動相的更換應逐漸用可混溶的溶劑轉移,每個流動相的體積應為柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。
              
              7、色譜柱存放時,用乙腈或甲醇填充色譜柱,并擰緊色譜柱接頭,防止溶劑揮發干燥。不要將緩沖溶液留在柱子中過夜或更長時間。
              
              8、色譜柱在使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結過濾器堵塞。此時應更換或拆下過濾器進行清洗;另一種可能是大分子進入柱子,污染柱頭;如果柱效降低或色譜峰變形,柱頭可能會塌陷,死體積可能會增加。
              
              一般安捷倫色譜柱在正確使用的情況下,使用壽命可達2年以上。硅膠基填料只能在ph2~9范圍內使用。柱子使用一段時間后,一些吸附力強的物質可能會殘留在柱子頂部,尤其是一些有色物質更容易被看到吸附在柱子頂部的填料上。新色譜柱使用一段時間后,柱頂填料可能會塌陷,降低柱效。這時也可以加入填料來恢復柱效。
              
              安捷倫色譜柱每次工作后,最好用洗脫能力強的洗脫液清洗。例如,ODS柱應用甲醇清洗至基線平衡。當使用鹽緩沖溶液作為流動相時,應在使用后用無鹽流動相清洗。含有鹵素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不應長時間接觸。如果安裝在HPLC儀器上的色譜柱不經常使用,應每4-5天打開并清洗15分鐘。
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